1．操作前，要*了解生物安全实验室的相关知识，生物安全柜的操作规程及操作中所需设备的操作方法。
　　
　　2．确认玻璃窗处于关闭位置后，打开紫外灯，对安全柜内工作空间进行灭菌。
　　
　　3．灭菌结束后，关闭UV灯。
　　
　　4．抬起玻璃门至正常工作位置。
　　
　　5．打开外排风机。
　　
　　6．打开荧光灯及内置风机。
　　
　　7．检查回风格栅，使之不要被物品堵塞，注意压力指示表读数并记录每次实验时压力指示表的读数。
　　
　　8．在无任何阻碍状态下，让安全柜至少工作10分钟。
　　
　　9．用消毒液*清洗手及手臂。
　　
　　10．穿上带有松紧口袖口的长袖工作褂，戴橡胶手套并套在袖口上，戴防护眼镜，如有必要的话，戴上防护面罩。
　　
　　11．用70%乙醇或中性消毒液擦拭安全柜内表面，再用纯水将乙醇或中性消毒液擦拭干净，并使之干燥。
　　
　　12．必须按实验程序放入实验材料，尽量将所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要过载，不要挡住前后风口。如所放置的物品较大，可抬高玻璃窗，并按“*”按键消除报警声音。
　　
　　13．将玻璃窗恢复到正常位置。
　　
　　14．放入实验材料及设备后，等2-3分钟，将工作区域内的空气尘埃清除掉。
　　
　　15．保持所有的实验材料离玻璃门至少4”，对有污染的物品要尽可能放到工作区域的后面操作。
　　
　　16．要将工作区域内的污染物质与洁净物质分开放置。
　　
　　17．尽量不要将污染物质放到洁净区域内。
　　
　　18．在操作期间，避免随便移动材料，避免操作者的手臂在前方开口处频繁移动；尽量减少气流干扰，如要尽量避免在工作时有人进出室内或在操作者背后走动。
　　
　　19．尽量不要使用明火。
　　
　　20．使用适当的灭菌技术。
　　
　　21．避免使用可干扰安全柜内气流流动的装置和程序。
　　
　　22．在操作过程中，如果有物质溢出或液体溅出，在将物品移出安全柜前，一定要对其表面进行消毒，为防止安全柜内有任何残留的污染物，在安全柜工作过程中，就要将安全柜内表面全部消毒。
　　
　　23．全部工作结束后，让安全柜在无任何阻碍的情况下继续至少工作5分钟，以清除工作区域内浮沉污染。
　　
　　24．所有接触了污染材料的物体，在从安全柜中取出前，要进行表面消毒。
　　
　　25．所有开口容器，从安全柜中拿出前要盖好。
　　
　　26．用70%的乙醇或适当的中性消毒剂，擦拭安全柜内表面，再用纯水将乙醇或中性消毒液擦拭干净，并使之干燥。
　　
　　27．关闭荧光灯和安全柜风机。
　　
　　28．关闭外排风机。
　　
　　29．关闭玻璃门，打开UV灯消毒。
　　
　　30．灭菌结束后，关闭UV灯。
　　
　　31．定期抬起工作区域下面板，擦拭或冲洗工作面底下空间。