详细介绍
采用的 LC 有许多严重的局限性。与其他分离方法相比,色谱的循环时间相对较长。这往往会限制 LC 在诸如在线监测之类的时间关键型应用中的使用。此外,每次运行所需的时间限制了方法开发和优化的工作量。由于色谱化学的复杂性,从常规分析到全面生产过程的许多当前应用都是在次优条件下运行的。最后,迄今为止,色谱柱受限的通量限制了 LC 用于从稀释进料溶液中选择性吸附材料的使用。
正相色谱: 混合物中的组分将以不同的速率洗脱,这取决于每个组分相对于下一个的极性。当用于分离的色谱柱比流动相更具极性时,该实验被称为正相方法。在正相色谱中,固定相是极性的,因此被分离的极性越大的溶质将越多地粘附在固定的吸附剂相上。当溶剂或溶剂梯度通过色谱柱时,极性较小的组分比极性较大的组分洗脱得更快。然后可以按极性递增的顺序单独收集组分,假设已实现足够的分离。这种色谱方法不是液固柱色谱所有的,并且经常在执行高效液相色谱 (HPLC) 时使用。
反相色谱:在反相色谱中,流动相和固定相的极性与进行正相色谱时的极性相反。不是选择非极性流动相溶剂,而是选择极性溶剂。或者,如果实验需要溶剂极性梯度,则必须首先使用极性大的溶剂,最后使用极性最小的溶剂进行梯度(与正相色谱相反)。溶剂的常见极性溶剂混合物包括水、甲醇和乙腈。获得固定相为非极性的色谱柱稍微困难和昂贵,因为所有固体吸附剂本质上都是极性的。非极性固定相可以通过用非极性液体涂覆硅烷化硅胶来制备。对硅胶进行硅烷化会减少硅胶' s 吸附极性分子的能力。常见的非极性液相包括有机硅和各种碳氢化合物。在 HPLC 中使用这种类型的色谱柱的替代品,其中使用键合液相作为固定相。极性较小的液体与色谱柱中的极性硅胶化学键合。因此,使用反相时,样品溶液中极性大的化合物将首先被洗脱,随后的组分具有降低的极性。
闪蒸色谱:由于上述常规柱色谱中流动相的洗脱速率主要受重力控制,因此色谱运行可能需要很长时间才能完成。快速色谱是一种改良的柱色谱方法,其中流动相在加压空气或真空的帮助下更快地通过色谱柱。真空管线连接到分离柱的底部,这会以比重力更快的速度拉动流动相溶剂和流动相中的组分通过柱子。可以在链接部分看到此设置的图。快速色谱由压缩空气或空气泵提供动力,通过推动流动相通过色谱柱并实现更快的流动相流速,就像真空促进快速色谱一样。对于这种方法,在分离柱的顶部连接了一个压缩空气管线。正是由于这个原因,快速色谱也被称为中压色谱。惰性气体用于不与流动相或固定相或组分混合物相互作用。这种色谱法通常使用氮气。许多仪器可用于尽可能高效地进行快速色谱分析:昂贵的色谱柱、泵和流量控制器。这会为色谱柱保持恒定且精确的气压或真空,以获得稳定的流动相流速和溶液中样品的良好分离。然而,可以使用更便宜的替代品,因为可以制作流量控制器,以便可以使用加压空气来促进快速色谱法。压缩空气管线连接到分离柱的顶部。正是由于这个原因,快速色谱也被称为中压色谱。惰性气体用于不与流动相或固定相或组分混合物相互作用。这种色谱法通常使用氮气。许多仪器可用于尽可能高效地进行快速色谱分析:昂贵的色谱柱、泵和流量控制器。这会为色谱柱保持恒定且精确的气压或真空,以获得稳定的流动相流速和溶液中样品的良好分离。然而,可以使用更便宜的替代品,因为可以制作流量控制器,以便可以使用加压空气来促进快速色谱法。压缩空气管线连接到分离柱的顶部。正是由于这个原因,快速色谱也被称为中压色谱。惰性气体用于不与流动相或固定相或组分混合物相互作用。这种色谱法通常使用氮气。许多仪器可用于尽可能高效地进行快速色谱分析:昂贵的色谱柱、泵和流量控制器。这会为色谱柱保持恒定且精确的气压或真空,以获得稳定的流动相流速和溶液中样品的良好分离。然而,可以使用更便宜的替代品,因为可以制作流量控制器,以便可以使用加压空气来促进快速色谱法。