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GE percoll分离液17-0891-01几大优势
点击次数：1260 发布时间：2018-12-28
GE percoll分离液17-0891-01几大优势
优势一：
在温和的条件下，分离细胞、亚细胞结构和较大的病毒分子（可小至~70S），保持其存活和形态的完整性
优势二：
对细胞无毒性
优势三：
可调整到生理状态下的离子强度和pH
优势四：
使用角转头，以中速离心，即可形成梯度
等渗梯度，密度zui大可达到1.3 g/ml。
操作方法及注意事项
1.不同浓度(密度)Percoll溶液的制备: 先用9份Percoll与1份8.5％ NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压，然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。
Percoll浓度(％) 70 60 50 40 30 20
比重g／ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031
2.不连续密度梯度Percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润，除去多余血清，这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下，使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置，有时相邻两层Percoll比重相差不大时，可将Percoll液放入注射器中，小针头斜面紧贴管壁，任其自然慢慢流下。
3.装样：样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异，一般加样体积不宜过大，细胞浓度也不可过高，否则会影响细胞的分离和回收。
4.离心：一般采用离心力为400g，时间20～25min。由于多层Percoll之间密度差别不大，因此离心机加速、降速时要慢，要平稳。
5.取样：当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时，可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。