的发酵工艺及控制

发酵过程需连续流加补人葡萄糖、硫酸铵以及前体物质盐，补糖率是关键的控制指标，不同时期分段控制。

在的生产中，让培养基中的主要营养物只够维持青霉菌在前40h生长，而在40h后，靠低速连续补加葡萄糖和氮源等，使菌半饥饿，延长的合成期，可大大提高产量。所需营养物的补加常用来控制营养缺陷型突变菌种，使代谢产物积累到大。

（1）培养基

发酵中采用补料分批操作法，对葡萄糖、铵、进行缓慢流加，维持适宜的浓度。葡萄糖的流加波动范围较窄，浓度过低使抗生素合成速度减慢或停止，过高则导致呼吸活性下降，甚至引起自溶，葡萄糖浓度调节是根据pH、溶解氧或CO.释放率予以调节。

碳源的选择：生产菌能利用多种碳源、乳糖、蔗糖、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、淀粉和天然油脂。生产成本中碳源占12%以上，对工艺影响很大；糖与6-氨基青霉烷酸（G-APA）结合形成糖基-6-APA，影响的产量。葡萄糖、乳糖结合能力强，而且随时间延长而增强，因此通常采用葡萄糖和乳糖。发酵初期，利用高效的葡萄糖使菌丝生长，当葡萄糖耗竭后，利用缓效的乳糖，使pH稳定，分泌，可根据形态变化滴加葡萄糖，取代乳糖。目前普遍采用淀粉的酶水解产物，葡萄糖化液流加，降低成本。

氮源：玉米浆是好的氮源，是玉米淀粉生产时的副产品，含有多种氨基酸及其前体和衍生物。玉米浆质量不稳定，可用花生饼粉或棉籽饼粉取代。需补加无机氮源。

无机盐：硫、磷、镁、钾等。铁有毒，控创在30ug/mL以下。

流加控制：补糖，根据残糖、pH、尾气中CO2和O：含量添加，残糖在0.6%左右，pH开始升高时加糖。补氮，流加酸酸铵、氨水、尿素，控制氨基酸态氮为0.05%。添加前体：合成阶段，及其衍生物、、、苯乙酰等均可为侧链的前休，直接掺入分子中，也具有刺激合成的作用。但浓度大于0.19%时对细胞和合成有毒性，还能被细胞氧化。可流加低浓度前体，次加入量低于0.1%，保持供应速率略大于生物合成的需要。

（2）温度

生长适宜温度为30℃，分泌温度为20℃，但20℃破坏少，周期很长。生产中采用变温控制，不同阶段不同温度，前期控制在25~26℃，后期降温控制在23

℃，过高会降低发酵产率，增加葡萄糖的消耗，降低葡萄糖至的转化率。有的发酵过程在茵丝生长阶段采用较高的温度，以缩短生长时间，生产阶段适当降低温度，以利于的合成。

（3）pH合成的适宜

pH为6.4~6.5，应避免超过7.0.青需素在破性条件下不稳定，易水解。缓冲能力弱的培养基，pH降低，意味着加糖率过高而造成酸性中间产物积累。pH上升，加糖率过低，不足以中和蛋白产生的氨或其他生理碱性物质。前期pH控制在5.7

~6.3，中后期pH控制在6.3~6.6，通过补加氨水进行调节。pH较低时，加入CaCO?、通氨调节或提高通气量。pH上升时，加糖或天然油脂。般直接加酸或碱自动控制，流加葡萄薪控制。

（4）溶解氧

溶解氧小于30%饱和度，产率急鹏下降，低于10%，会造成不可逆的损害，因此不能低于30%饱和溶解氧浓度。通气比般为1：0.8，溶解氧过高，菌丝生长不良或加糖率过低，呼吸强度下降，影响生产能力的发挥。适宜的搅拌速度，保证气液混合，提高溶解氧量，根据各阶段的生长和耗氧量不同，应对搅拌转速进行调薇：

（5）菌丝生长速度与形态、浓度

对于每个有固定通气和搅拌条件的发酵罐内进行的特定好氧过程，都有个使氧传递速率（OTR）和氧消耗率（OUR）在某溶解氧水平上达到平衡的临界菌丝浓度。超过此浓度，OUR>OTR，溶解氧水平下降，发酵产率下降。在发辞稳定期，湿菌浓度可达15%~~20%，丝状菌干重约为3%，球状菌干重在5%左右。另外，因补人物料较多，在发酵中后期般每天带放次，每次放掉总发酵液的10%左右。

菌丝的生长形态有丝状生长和球状生长两种。丝状菌丝由于所有菌丝体都能充分和发酵液中的基质及氧接触，生产率高，发酵黏度低，气、液两相中氧的传递率提高，允许更多菌丝生长。球状菌丝形态的控制，与碳、氮源的流加状况，搅拌的剪切强度及稀释度相关。

（6）消沫

发酵过程泡沫较多，需补入消沫剂。少量多次。不宜在前期多加入，以免影响呼吸代谢。