Hoechst 33258染色液(1mg/ml)使用说明书

【产品组成】

Component	SBJ-1804S	Store at
Hoechst 33258染色液(1mg/ml)	1ml	-20℃，避光

【保存条件】

—20℃,避光,12个月

【产品概述】

  Hoechst 33258 也称 bisBenzimide H 33258或HOE 33258 ，分子式为C₂₅H₂₄N₆O · 3HCl。Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也用于普通的细胞核染色、DNA 染色。Hoechst 33258 染色液是浓缩的储存液，稀释后使用，一般推荐工作浓度为 1～5μg/ml，用于固定细胞或组织的细胞核染色。

【使用方法】

(一)固定的组织细胞染色

1、根据实验具体要求，用无菌去离子水稀释到自己所需浓度，即为Hoechst 33258染色工作液。细胞核染色时，一般推荐工作浓度为1～5μg/ml。

2、于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，则*行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色，如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。

2、室温放置，轻轻吸除Hoechst 33258染色液。

4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3次，每次3～5min。

5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。

(二)活细胞染色

1、根据实验具体要求，用无菌去离子水稀释到自己所需浓度，即为Hoechst33258染色工作液。细胞核染色时，一般推荐工作浓度为1～5μg/ml。

2、取96、24、6孔板培养细胞至合适状态，按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、

6孔板加入1ml的比例，加入适当的Hoechst 33258染色液，染液必须充分覆盖细胞。

3、在适宜于细胞培养的条件下培养。

4、轻轻吸除Hoechst 33258染色液。

5、用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3次。

6、进行荧光检测。

【注意事项】

1、Hoechst 33258染色液(1mg/ml)应稀释至合适的浓度后使用。

2、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。

3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4、避免反复冻融，否则容易失效。

5、Hoechst 33258对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。