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人流感病毒B(FLU B)ELISA试剂盒使用说明书
点击次数:546 发布时间:2011-5-16
人流感病毒B(FLU B)ELISA试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称:
通用名:人流感病毒B(FLU B)酶联免疫分析试剂盒
使用目的:
本试剂盒定性测定人血液、或其它相关组织中流感病毒B(FLU B)
实验原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人流感病毒B(FLU B)。用纯化的流感病毒B(FLU B)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中流感病毒B(FLU B)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的流感病毒B(FLU B)抗体结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人流感病毒B(FLU B)的存在与否。
试剂盒组成:
1 | 20倍浓缩洗涤液 | 30ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1/瓶 | 8 | 阳性对照 | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 阴性对照 | 0.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求:
1.标本处理:血清、血浆标本可直接检测
2.标本按要求制备后尽早进行实验。如不能及时检测,可将标本在-20℃保存一个月,但应避免反复冻融。
3.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将20倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
结果判定:
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为人流感病毒B(FLU B)阴性
阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为人流感病毒B(FLU B)阳性
规格:
96人份/盒
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月