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C1091TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)

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  • 上海力敏实业有限公司
  • 2016-02-04 08:16:45
  • 上海市
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【简单介绍】

碧云天生产的显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过*标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞

【详细说明】

碧云天生产的显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过*标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上*(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,zui后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞,这就是本试剂盒通过TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点。(1)高灵敏度:可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。(2)特异性好:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。(3)快速:仅需约2-3个小时即可完成。(4)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,同时检测多个凋亡指标。
本试剂盒足够检测20个样品。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

C1091-1

TdT酶

40μl

C1091-2

Biotin-dUTP

960μl

C1091-3

TdT酶稀释液(选用)

500μl

C1091-4

Streptavidin-HRP

22μl

C1091-5

Streptavidin-HRP稀释液

1ml

C1091-6

DAB显色液A

6ml

C1091-7

DAB显色液B

6ml

C1091-8 标记反应终止液 6ml

说明书

1份

保存条件:
-20℃保存。DAB显色液A和DAB显色液B需避光保存。
注意事项:
需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS,用于封片的抗荧光淬灭封片液(P0126)等适当的封片液,用于固定的4%多聚甲醛或向碧云天订购免疫染色固定液(P0098),同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向碧云天订购免疫染色洗涤液(P0106)。 需自备过氧化氢,除石蜡切片外需自备甲醇。
如果用于石蜡切片的检测,需自备蛋白酶K和二甲苯。蛋白酶K(ST533)可以向碧云天订购。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 

    
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