2、灭菌

灭菌时至少要求两人在场，一人负责操作各种阀门，另一人负责观察报告各项参数。

确认各阀门处于关闭状态后，打开蒸汽发生器进水阀，启动蒸气发生器，蒸气发生器开始自动进水，此时应打开蒸气发生器下部的排水阀，尽量放去水锈后关闭排水阀。注意观察蒸汽发生器内水量液位，防止事故。此时*打开夹套出气阀阀门，缓慢打开蒸汽发生器总阀门，缓慢部分打开夹套进气阀，开始对夹套通入水蒸气。开始时可能蒸汽压力不稳，压力表指针剧烈摆动，可以适当关小夹套进气阀，然后依次打开取样阀出蒸汽阀，取样阀进蒸汽阀，底阀出蒸汽阀，底阀进蒸汽阀，对取样阀和底阀灭菌，同时排尽压力不稳的水蒸气。水蒸气压力不剧烈变化时再依次关闭、底阀出气阀。罐内温度逐渐上升，至所设置90°温度时，搅拌电机停止转动，此时打开罐体总进气阀，打开罐体出气管阀，依次打开以下阀门：打开出气调节阀，缓慢打开罐体进蒸汽阀对罐内通入蒸汽，空气滤器表压开始上升，超过0.1MP时打开冷凝水阀门疏水，继续开大罐体进蒸汽阀，除尽罐内空气后，罐内压缓慢上升，调整出气调节阀，使之达到灭菌所要求温度压力，达到灭菌温度时计时开始。调整夹套进气阀、罐体进蒸汽阀和出气调节阀，使温度、罐压保持所设温度。灭菌时间到后，依次关闭已开的各进汽阀门，关闭蒸汽总阀门，*放开罐内尾气排气阀放掉罐内压力，关闭蒸汽发生器电源。打开空气压缩机，等罐压降至0.05MP时，缓慢打开进气调节阀，维持发酵罐内正压。
 

灭菌过程中，操作员应穿长衣长裤，带防护手套，防止烫伤。灭菌过程中如果蒸汽发生器自动进水，蒸汽总压将迅速下降，必要时可以适当开大蒸汽总阀门，保持压力，但要小心观察压力变化。对罐内通蒸汽时，灭菌后罐压下降较快，注意通无菌空气时机。尽量不要使空气压缩机和蒸汽发生器同时工作。灭菌过程中空气滤器压力不应超过0.2MP。冷凝水的大小将影响罐内液体灭菌后浓度，要考虑蒸汽冷凝水增加量。
 

3、发酵

控制进气阀排气阀的大小可以调整通气量和罐压，控制搅拌转数使发酵溶氧满足工艺要求。发酵时打开罐体进水总阀，打开夹套出水阀和夹套进水阀，此时系统自动通过控制夹套水温控制发酵温度。由于罐内正压，接菌时关小进气阀，适当降低罐压至0.01—0.02MP，用火焰圈保护将接种口快速打开（防止气流将火焰熄灭），接种后快速关闭接种口。将补料系统的各个瓶及附属胶管灭菌后联入主机（注意方向），在火焰圈保护下刺破硅胶垫，安装好补料系统。此时工作站上应显示有系统的各个参数实时监控。注意做好参数记录工作。
 

发酵进行到后期时，可能会有菌体堵塞出气管，现象为通气量下降，罐压略有增高。此时人为左右旋转出气阀，可以使堵塞缓解。