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免疫化学发光法(双抗体夹心法)测定IgE

来源:北京伯乐生命科学发展有限公司上海办事处 (上海天崛电子科技有限公司)   2010年09月25日 08:56   1938

b免疫化学发光法(双抗体夹心法)测定IgE

 

    [检测方法]  免疫化学发光法(双抗体夹心法)。

    [方法学原理]  加入与磁性颗粒共价结合的鼠抗人IgE抗体、待测标本以及吖啶酯标记的羊抗人IgE抗体(1gElite试剂),经过温育形成固相包被抗体—抗原(1gE)—吖啶酯标记抗体复合物,经洗涤后,加人氧化剂(H2O2)发光,其光量子数与IgE浓度呈良好的线性相关。通过光量子数与IgE浓度制作标准曲线,根据样本产生的光量子数可得出IgE含量。

    [标本准备]  静脉血2ml,不抗凝。

    [试剂]

    1.免疫化学发光法配套试剂及定标液

    2.质控物(高、中、低)

    [仪器]  ACSl80免疫发光仪。

    [检测步骤]

    1.将血清编号后加入反应管内,插入样品盘;

    2.将试剂放入试剂盘;

    3.将编号及样品盘号对应输入电脑,并选择检测项目IgE,保存;

    4.按START键运行。

    5.ACSl80仪将30/Il样本液装入反应杯中;将100u1 IgE lite试剂与450ul总IgE固相试剂加入,并于37℃环境中温浴7.5min;用去离子水冲洗、分离反应相;加入300tA试剂1与试剂2以启动光化学反应,反应完成后自动报告结果(详情见各仪器系统操作说明)。

  [正常参考值]  0—378U/m1

  [注意事项]

  1.试剂取出应充分混匀。

  2.样本应充分凝固,无纤维、气泡及其他物质。

    3.样本检测应在8h内完成,否则应置2~8℃保存。

    4.48h内不检测,应将样本于一20℃冻存,且只能冻融1次。

    5.若试剂室温放置超过40h应弃之不用,不使用任何过期试剂。

    [临床意义]  IgE升高,主要见于过敏性疾病。在感染性疾病中,如寄生虫感染、支气管—肺曲霉菌病也可升高。

 

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