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《谷物中硒代蛋氨酸、硒酸盐和亚硒酸盐的测定》征求意见

2021-11-02 08:46:32 来源：仪表网 阅读量：7910

　　由安康市富硒产品研发中心、北京市疾病预防控制中心的《谷物中硒代蛋氨酸、硒酸盐和亚硒酸盐的测定 液相色谱-电感耦合等离子体质谱用法》团体标准已完成征求意见稿的编制。为保证标准的科学性、严谨性和适用性，现向社会各界公开征求意见。
 
　　硒是人体必需微量元素之一，具有预防癌症、清除体内自由基，抗衰老、抗氧化等作用，能保护细胞膜的结构和功能，增强机体免疫力，对于心血管功能、生育、视力等有重要影响。缺硒会导致克山病、冠心病、大骨节病、糖尿病等多种疾病。虽然硒对人体而言是营养元素， 但研究发现硒的安全阈值较窄，硒摄入量超过安全阈值时则会对人体健康造成危害，发生急 性或慢性硒中毒，在我国湖北恩施曾发生大范围人、畜脱毛、脱甲等中毒症状，安康紫阳也 有类似的现象发生，其原因为高硒土壤环境所致的硒中毒。因此，科学、合理的摄入硒对健 康才是安全有效的。国际学术组织联合会建议成年男女膳食硒适宜需要量分别为 40 微克/ 日和 30 微克/日。英国规定人体每日摄入量为 70 微克。1988 年，中国营养学会推荐成人膳 食的日摄入量为 50～250 微克。目前全球有 40 多个国家和地区不同程度缺硒，我国 72%地 域人群缺硒，缺硒是一个世界性问题。
 
　　随着对硒元素研究的深入，人们更多关注硒的营养价值，由于中国大部分地区缺硒，近 年来各种富硒保健品、富硒食品纷纷面世，随着功能农业的发展，富硒农产品更是百花齐放， 如富硒大米、富硒小麦等富硒谷类食品的研究日益受到人们的青睐。天然富硒农产品越来越 受到人们的关注，其需求量和种类要求也越来越多。但同时市场上的富硒产品良莠不齐，消 费者对富硒产品的认识不足，天然富硒农产品与功能富硒农产品的差异等，都急需对硒有进 一步的研究和认识。在自然界，硒以不同的化合物形式存在，硒的毒理学和生理学研究进一步表明，硒的不同形态在生理毒性和生物利用率等方面各不相同，有机形态存在的硒，如硒 蛋白、硒代氨基酸、硒多肽等在机体内能转变为生理活性物质，为人体所吸收利，硒的生物 功能取决于有益形态的硒含量。因此，仅测定谷类食品中总硒含量不能满足目前食品安全与 食品营养的需要，需要进一步测定硒在谷类食品中的存在形式。
 
　　进行硒形态研究分析，首先应将各种硒形态化合物从样品基体中有效的提取出来，并避 免硒形态的降解和各硒形态之间的转换。目前农产品中硒形态的提取方法主要有浸提法和酶 解提取法，在进行样品分析时，首先要根据农产品中硒形态的种类和含量，权衡前处理操作 简便于否、提取效率及操作成本等进行优化选择。
 
　　研究报道硒在农产品中主要以有机硒形式存在，包括硒代氨基酸、硒蛋白、硒多糖和硒 核酸等。农产品样品经过提取处理后，需要对提取液中的硒形态进行有效分离和准确测定。 目前，在硒形态分析中常用的分离方法主要为色谱分离方法，包括气相色谱(GC)和高效 液相色谱(HPLC)。电泳技术在硒形态分析中也有相关报道，主要包括毛细管电泳(CE) 和凝胶电泳(GE)。常用的检测方法有电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)、原子荧光光谱 (AFS)、原子发射光谱(AES)、原子吸收光谱(AAS)等。本研究采用灵敏、准确的高 效液相色谱(HPLC)与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用技术进行农产品中硒形态化 合物的分析测定。
 
　　本标准规定了液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法测定谷物中硒代蛋氨酸、硒酸盐和亚硒酸盐 含量的方法。
 
　　方法原理：
 
　　试样中硒代蛋氨酸、硒酸盐和亚硒酸盐通过蛋白酶酶解后，经离子交换色谱柱分离，电感耦合等离 子体质谱仪测定，以色谱保留时间定性，外标法定量。
 
　　仪器与设备：
 
　　1.液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用仪(LC-ICP-MS)。2.天平：感量分别为 0.01 mg、0.1 mg 和 1 mg。3.低温离心机：转速≥9000 r/min。4.恒温超声波清洗器：可控温 0 ℃～80 ℃(温度精度±2 ℃)。5.pH 计：精度为 0.01。6.高速粉碎机：转速≥3000 r/min。7.水系滤膜：0.22 μm。
 
　　样品预处理：
 
　　大米、小麦、玉米等样品去杂物后粉碎，并过 60 目筛混合均匀，装入洁净聚乙烯瓶中，于干燥处 密封保存备用。
 
　　试样提取：
 
　　称取 0.1 g～0.5 g(精确到 0.001 g)样品，置于 15 mL 离心管中，加入 5 mL 水和 20 mg 蛋白酶 XIV， 涡旋 30 s，37 ℃水浴超声 3 h，期间振摇数次。静置 10 min，4 ℃下以 9000 r/min 离心 10 min，取上清 液过 0.22 μm 滤膜，待测。同时做空白试验。
 
　　试样测定：
 
　　依次将空白溶液和试样溶液注入液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用仪中，得到色谱图，以色谱 保留时间进行定性。根据标准曲线得到试样溶液中硒代蛋氨酸、硒酸根、亚硒酸根的浓度，平行测定次 数不少于两次。
 
　　本标准适用于大米和小麦中硒代蛋氨酸、亚硒酸盐和硒酸盐的测定；玉米中硒代蛋氨酸和硒酸盐的 测定。
 
　　当样品称样量为0.3 g，提取液体积为5 mL时，硒代蛋氨酸方法定量限为0.015 mg/kg、硒酸盐方法 定量限为0.010 mg/kg、亚硒酸盐方法定量限为0.007 mg/kg。
 

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